上海富衡 | HCC827 细胞离心后吹打不均匀的应对方法

在细胞实验操作中,遇到 HCC827 细胞离心后难以用培养基重悬吹打均匀的情况,着实令人头疼,但别着急,我们可以从多个方面寻找解决之道。

首先,检查细胞状态至关重要。若细胞本身生长状态不佳,比如出现大量凋亡、坏死,就容易抱团,导致吹打困难。在离心前,通过显微镜仔细观察细胞形态,正常的 HCC827 细胞应呈上皮样,轮廓清晰,核质比适中。若发现异常,回溯细胞培养过程,排查是否存在培养基营养成分不足、培养箱温度或二氧化碳浓度不稳定等问题,及时调整培养条件,待细胞状态恢复后再进行后续操作。


优化吹打技巧也能事半功倍。选择合适的移液器及枪头,枪头的口径不宜过小,避免对细胞造成过大的剪切力,同时确保枪头与管壁贴合紧密,减少气泡产生。吹打时,动作要轻柔、缓慢且有规律,从培养皿底部的一侧开始,逐步向另一侧移动,呈 “之” 字形或螺旋形路径,确保每个角落的细胞都能被充分接触到。不要一味追求速度,二三十次吹打若未均匀,可适当增加次数,但要随时观察细胞悬液状态。

考虑改变培养基成分。有时候,培养基中的某些成分可能促使细胞粘连,尝试更换为无血清培养基或添加适量的细胞分散剂,如胰蛋白酶、EDTA 等,但要严格控制浓度与作用时间,防止过度消化损伤细胞。例如,用低浓度胰蛋白酶短暂处理细胞团块,使其松散后再用培养基终止消化并吹打,可能会改善均匀度。

此外,还可以借助外力辅助。将装有细胞悬液的离心管置于小型涡旋振荡器上,低速振荡数秒,帮助打散细胞团,之后再结合移液器吹打,效果可能更佳。但同样要注意力度把控,避免过度振荡使细胞受损。


遇到 HCC827 细胞离心后吹打不均匀的问题,冷静分析,从细胞状态、操作技巧、培养基优化到辅助手段多管齐下,逐步排查、尝试,相信能够让细胞均匀分散,为后续的实验研究奠定良好基础,确保实验顺利推进。


原创作者:上海富衡生物科技有限公司

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